Tecniche di preparazione entomologiche ai fini medici e forensi

Abstract

Forensic entomology is a branch of forensic science that deals with the collection and analysis of insects and other arthropods. This discipline is applied in various contexts such as: environmental infestations, contamination of foodstuffs and in the veterinary and forensic field. In entomology the larvae of dipterans play an important role, in fact, they are involved in the processes of decomposition of the body. Their discovery at a crime scene can help reconstruct criminal events and answer questions from magistrates and investigators (6W). In the forensic field, the larvae are involved in the process of miasis, parasitic infestations on humans and animals. The infestation occurs after the deposition of eggs on the skin and/or mucous membranes, when these open, the larvae feed on the tissues and fluids of the vertebrate causing painful injuries.

Knowledge of the external and internal morphology of immature stages of dipterans is still limited as taxonomic research has focused primarily on the study of adult stages.

The purpose of the activity carried out during the internship is to discover techniques aimed at exalting the morphology of the larvae in order to provide new diagnostic tools. For this study two different species of larvae were used; Calliphora vomitoria (Linnaeus, 1758) and Lucilia sericata (Meigen, 1826). The first part of the activity allowed to highlight some of the external morphological characteristics, in particular spicules and muscle insertions (MAS). For this study, various staining techniques were used, such as permanent markers of various colors and dyes such as eosin, hematoxylin, blue cotton and blue Comassie. Histological techniques have been used to analyse the internal morphology of specimens. The specimens were included in paraffin, cut to the microtome to obtain sections and finally colored with two different colors; hematoxylin and eosin (EE) and Masson’s trichromica. Later, the study on the morphology of the larvae within ani

L’entomologia forense è una branca delle scienze forensi che si occupa della raccolta e dell’analisi di insetti e altri artropodi. Questa disciplina trova applicazione in svariati contesti quali: infestazioni ambientali, contaminazioni di derrate alimentari e in ambito veterinario e medico legale. Nell’entomologia le larve di ditteri giocano un ruolo importante, infatti, sono coinvolte nei processi di decomposizione del corpo. Il loro ritrovamento in una scena del crimine può aiutare a ricostruire gli eventi criminosi e a rispondere alle domande poste dai magistrati e dagli investigatori (6W). In ambito medico-legale, le larve sono coinvolte nel processo di miasi, infestazioni parassitarie su uomo e animali. L’infestazione avviene in seguito alla deposizione di uova sulla cute e/o sulle mucose, quando queste si schiudono, le larve si nutrono dei tessuti e dei fluidi del vertebrato causando dolorose lesioni. Le conoscenze sulla morfologia, sia esterna che interna degli stadi immaturi di ditteri è ancora limitata poiché le ricerche tassonomiche si sono concentrate prevalentemente sullo studio degli stadi adulti.

Lo scopo dell’attività svolta durante il tirocinio è quello di scoprire tecniche volte all’esaltazione della morfologia delle larve al fine di fornire nuovi strumenti diagnostici. Per questo studio sono state utilizzate due specie di larve differenti; Calliphora vomitoria (Linnaeus, 1758) e Lucilia sericata (Meigen, 1826). La prima parte dell’attività ha permesso di mettere in evidenza alcune delle caratteristiche morfologiche esterne, in particolare le spicole e le inserzioni muscolari (MAS). Per questo studio sono state utilizzate varie tecniche di colorazione, quali pennarelli indelebili di vari colori e coloranti come eosina, ematossilina, cotton blu e blu di Comassie. Per l’analisi della morfologia interna degli esemplari sono state utilizzate tecniche istologiche. Gli esemplari sono stati inclusi in paraffina, tagliati al microtomo per ricavarne delle s