Ruolo dell'autoimmunità nella patogenesi dell'infezione da SARS-COV-2 e nello sviluppo di rari effetti avversi associati alla vaccinazione anti-SARS-COV-2

Abstract

Lo scopo principale del mio lavoro è stato quello di contribuire alla messa a punto, in urgenza, del metodo di identificazione e dello studio del coinvolgimento degli anticorpi anti-PF4 nei pazienti che manifestavano effetti avversi trombotici a seguito di vaccinazione anti-SARS-CoV-2 di tipo adenovirale inattivato (AVV). Il meccanismo alla base della VITT appare diverso rispetto ai comuni eventi trombotici e si è ipotizzato che possa essere coinvolto un fenomeno immunitario simile a quello della HIT. Il test in chemiluminescenza per la ricerca degli Ab anti-PF4, considerato il gold standard in caso di HIT, in soggetti affetti da VITT non è risultato sufficientemente sensibile e pertanto si è provveduto alla messa a punto di un test ELISA il più possibile sensibile e specifico per la diagnosi di VITT. Tre campioni su 91 pervenuti al laboratorio con sospetto di VITT, sono risultati positivi per anti PF4. Per 1 paziente dei 3 è stato possibile dimostrare la negativizzazione di tali anticorpi a distanza di 1 anno. Per tutti e 3 i pazienti affetti da VITT sono stati analizzati diversi fattori ematologici con evidenza di alterazione dei valori di piastrine, D-dimero e INR. Nella seconda parte si riportano i dati di uno studio preliminare volto alla ricerca degli anticorpi anti-ACE2 su campioni di pazienti ricoverati o in follow-up per reazioni neurologiche a seguito di infezione da SARS-CoV-2 o di apparente reazione avversa a vaccinazione. L’analisi è stata effettuata con test ELISA paragonando campioni di pazienti con manifestazioni neurologiche post-vaccinazione, forme di COVID grave, pazienti VITT e controlli sani. I risultati mostrano un livello di anti-ACE2 significativamente inferiore nei pazienti con sintomi neurologici rispetto ai controlli sani, mentre risulterebbe un incremento di tali Ab nelle forme severe di COVID-19. Lo studio è ancora in corso ed è necessario incrementare il numero dei casi per chiarire l’eventuale ruolo degli Ab anti ACE2.

The main purpose of my research was to contribute to develop, in urgency, the identification method and the study of the involvement of anti-platelet factor 4 (PF4) antibodies in patients with thrombotic adverse effects after adenoviral inactivated (AVV)-based vaccination against SARS-CoV-2. It was quickly demonstrated that the physiological mechanism leading to the VITT, it was hypothesized that it could be involved an immune phenomenon similar to that involved in HIT. In our experience, the chemiluminescence test for the search for anti-PF4 antibodies, considered the gold standard in the case of HIT, was not sufficiently sensitive in subjects affected by VITT and therefore an ELISA test, as sensitive and specific as possible, was developed for the diagnosis of VITT. Three out of 91 plasma samples brought at the lab, being probably suspected of a VITT diagnosis, tested positive for anti PF4. For one of the three patients it was possible to demonstrate the negativization of these antibodies after a year from the clinical event. For all three patients affected by VITT different haematological factors were analyzed with evidence of platelet values alteration, D-dimer and INR. The second part of the research reports data from a preliminary study aimed at searching for anti-ACE2 antibodies on some hospitalized or follow-up patients for neurological reactions following SARS-CoV-2 infection or apparent adverse reaction to vaccination. The analysis was carried out with the ELISA test comparing samples of patients with post-vaccination neurological manifestations, severe forms of COVID, VITT patients and healthy controls. Preliminaries results show a significantly lower anti-ACE2 level in patients with neurological symptoms compared to healthy controls, while there would be an increase of these Ab in the severe forms of COVID-19. The study is still ongoing and it is necessary to increase the number of cases to clarify the possible role of anti ACE2.