Tipizzazione molecolare del carcinoma endometriale di alto grado

Abstract

Introduzione: Il carcinoma dell’endometrio(EC) è la neoplasia ginecologica più frequente. Distinti in tipo I e II sec. Bokhman, la collocazione dei carcinomi endometrioidi G3 rimane discussa. Le linee guida ESGO/ESTRO/ESP2020 identificano gruppi prognostici sulla base delle caratteristiche morfo-molecolari(POLE/MMR/NSMP/TP53). L’obiettivo dello studio è valutare l’applicabilità clinica dell’analisi NGS atta a definire un’appropriata classe di rischio e l’applicazione per una migliore definizione diagnostica e prognostica degli EC di alto grado. Casistica e Metodi: Sono stati considerati casi di EC sieroso(OHEC), endometrioide di alto(HGEC) e basso(LGEC) grado (periodo 2018-2020) refertati con protocollo morfologico ed immunoistochimico. Dopo una fase preanalitica standardizzata(criteri scelta blocchetti FFPE: adeguata conservazione/alta cellularità neoplastica/bassa percentuale di necrosi), il DNA tumorale è stato estratto semi-automaticamente dopo macrodissezione manuale e analizzato tramite NGS con pannello di 10 geni (CTNNB1,KRAS,MLH1,MLH3,MSH2,MSH6,PMS2,POLE,PTEN,TP53). Risultati:Sono stati considerati 31 casi(n=8 HGEC, n=8 OHEC, n=15 LGEC). Le 3 categorie mostrano rilevanti differenze morfo-molecolari. L’NGS ha dato buoni risultati analitici ed ha permesso di classificare i casi con il nuovo algoritmo diagnostico: POLEmut(n=2), MMRd(n= 3), NSMP(n=17), TP53mut(n=9). Tra gli HGEC: 2 POLE,4 NSMP,2 TP53 mut. La classificazione di rischio molecolare ha mostrato una buona correlazione con la morfologica (k=0,9), con 1 caso ridotto di classe di rischio ed 1 aumentato. Conclusioni: Lo studio ha evidenziato che i protocolli delle fasi preanalitica e analitica usati sono robusti e possono condurre a risultati molecolari che rientrano negli standard richiesti per l’uso nella pratica clinica per un più preciso inquadramento diagnostico-terapeutico. L’implementazione della classificazione è particolarmente rilevante per una migliore stratificazione prognostica degli HGEC.

Introduction: Endometrial cancer (EC) is the most frequent gynaecological malignancy. Distinguished in type I and II according to Bokhman’s classification, the location of G3 endometrioid carcinomas remains debated. The ESGO/ESTRO/ESP 2020 guidelines identify prognostic groups based on morpho-molecular characteristics (POLE / MMR / NSMP / TP53). The study aims to evaluate the clinical applicability of NGS analysis to define an appropriate risk class and application for a better diagnostic and prognostic definition of high-grade ECs. Cases and Methods: Cases of serous carcinoma (OHEC), high (HGEC) and low (LGEC) grade endometrioid carcinoma (period 2018-2020) diagnosed with the morphological and immunohistochemical protocol were considered. After a standardized pre-analytical phase (criteria for choosing FFPE blocks: adequate storage, high neoplastic cellularity, low percentage of necrosis), the tumour DNA was semi-automatically extracted after manual macrodissection and analyzed by NGS with a panel of 10 genes (CTNNB1, KRAS, MLH1, MLH3, MSH2, MSH6, PMS2, POLE, PTEN, TP53). Results: 31 cases were considered (n=8 HGEC, n=8 OHEC, n=15 LGEC). The 3 categories show significant morpho-molecular differences. The NGS analysis gave good analytical results and allowed the cases to be classified according to the new diagnostic algorithm: POLEmut (n = 2), MMRd (n = 3), NSMP (n = 17), TP53mut (n = 9). Among the HGECs: 2 POLES, 4 NSMP, 2 TP53 mut. The molecular risk classification showed a good correlation with the morphological (k = 0.9), with 1 case reduced and 1 increased. Conclusions: the study showed that the protocols of the pre-analytical and analytical phases used are robust and can lead to molecular results that fall within the standards required for use in clinical practice for a more precise diagnostic-therapeutic management of patients. The implementation of the classification is particularly relevant for better prognostic stratification of HGECs.