Gli eosinofili come cellule presentanti l’antigene nel pemfigoide bolloso

Abstract

Introduzione: Il pemfigoide bolloso (PB) è una malattia autoimmune caratterizzata da autoanticorpi diretti contro antigeni emidesmosomiali della giunzione dermoepidermica, BP180 e BP230. Gli eosinofili hanno un importante ruolo patogenetico e potrebbero assumere la funzione di cellula presentante l'antigene (APC), con espansione e attivazione clonale dei linfociti TCD4+.

Obiettivi: Si è voluto determinare se gli eosinofili nel PB esprimano il fenotipo di APC e se abbiano la capacità di presentare gli antigeni ai linfociti T CD4+, con conseguente proliferazione clonale.

Metodo: È stato effettuato uno studio multicentrico prospettico in cui sono stati reclutati 10 casi con malattia attiva (≥ 3 bolle) e 7 controlli (5 sani e 2 allergici). Per comprendere se gli eosinofili acquisiscono il profilo di APC, sono state eseguite analisi di citotofluorimetria per valutare l'espressione di HLA-DQ, CD80 e CD86. Studi funzionali sono stati eseguiti su un paziente con PB, un soggetto sano e uno allergico, facendo incubare gli eosinofili con antigeni ed eseguendo co-colture con linfociti T CD4+, per osservarne, in vitro, le proprietà di APC.

Risultati: Non sono emerse variazioni dell' immunofenotipo degli eosinofili in alcuna condizione di incubazione con antigeni al tempo T0 (basale), T1 ( 24 ore) e T2 (5 giorni).Gli eosinofili dei controlli allergici presentano maggiormente il profilo di APC (espressione percentuale media di HLA-DQ = 77.78%, CD80 = 9,09%, CD86 = 6,18%, CD80 + CD86= 4,56%) rispetto ai soggetti con PB (HLA-DQ = 48,68%, CD80 = 0,51%, CD86 = 3,04%, CD80 + CD860 = 0,15%) e a quelli sani (HLA-DQ = 37.7%, CD80 = 0,51%, CD86 = 1,44%, CD80 + CD86 = 0,13%). Non sono state valutate significative variazioni dell' attivazione linfocitaria nei tre gruppi.

Conclusioni: Gli eosinofili, in condizioni sia fisiologiche, sia patologiche, possono presentare l’ immunofenotipo delle APC. Tuttavia, l’effettiva capacità di presentare l’antigene rimane in dubbio.

Background: Bullous pemphigoid (BP) is an autoimmune disease, which is characterized by pathogenetic autoantibodies against hemidesmosomal antigens of the dermo-epidermal junction: BP180 and BP230. Eosinophils contribute to the pathogenesis and could assume the role of antigen-presenting cells (APCs), with consequently clonal expansion of T CD4+ lymphocytes.

Objectives: To study if eosinophils can present the typical immunophenotype of APCs in BP and if they can assume the role of APCs, inducing lymphocyte proliferation.

Methods: We did a prospective, multicentre trial comparing 10 patients with diagnosis of BP and active disease (at least 3 bullae), to 7 controls (5 healthy and 2 allergic). Eosinophil expression of HLA-DQ, CD80, CD86 was determined by flow cytometry. Functional studies were performed on a patient with BP, a healthy subject and an allergic control, incubating eosinophils with antigens and performing co-cultures with T CD4+ lymphocytes, in order to determine, in vitro, the function of eosinophil as APCs.

Results: As it concerns eosinophil immunophenotype, no differences were found in any incubation condition at T0 (basal), T1 (24 hours) and T2 (5 days). Eosinophils from allergic controls had the higher expression of HLA-DQ, CD80, CD86 (mean expression of HLA-DQ = 77.78%, CD80 = 9.09%, CD86 = 6.18%, CD80 + CD86 = 4.56%) compared to patients with bullous pemphigoid (HLA-DQ = 48.68%, CD80 = 0.51%, CD86 = 3.04%, CD80 + CD860 = 0.15%) and to healthy subjects (HLA-DQ = 37.7%, CD80 = 0.51%, CD86 = 1.44%, CD80 + CD86 = 0.13%). No significant differences between groups were found, as it regards lymphocyte activation.

Conclusions: The results show that eosinophils, both in physiological and in pathological conditions, can present the immunophenotype of APCs. However, the capacity of eosinophils to function as APCs is not confirmed.