CLIC1 come vulnerabilità terapeutica del glioblastoma umano: il riposizionamento farmacologico come nuova strategia per inibire CLIC1 nelle cellule staminali del glioblastoma

Abstract

La recidiva del glioblastoma (GBM) è fortemente sostenuta dalle cellule staminali simil-glioblastoma (GSC), che mantengono la crescita tumorale, l'invasività e la resistenza alle terapie. Questo studio ha investigato CLIC1 come potenziale bersaglio terapeutico in modelli di GSC derivati da pazienti e ha valutato se farmaci riposizionati potessero interferire con questa popolazione cellulare altamente aggressiva.

CLIC1 è stato confermato nelle colture di GSC sia a livello di trascritto che di proteina, con evidenze di localizzazione alla membrana plasmatica e di attività funzionale come canale ionico. Sia la metformina (MET) sia il triamterene (TMT) hanno ridotto la vitalità, la crescita, la proliferazione, la frequenza delle cellule staminali e la capacità invasiva delle GSC, mostrando effetti più marcati nelle cellule staminali rispetto alle cellule di GBM differenziate. Il TMT ha evidenziato il profilo più favorevole, risultando efficace a concentrazioni inferiori e inibendo le correnti mediate da CLIC1 in modo più efficace rispetto alla MET. Nei saggi di combinazione, entrambi i farmaci hanno potenziato la risposta alla temozolomide in condizioni selezionate. La loro attività è stata inoltre confermata in modelli xenotrapiantati di zebrafish, nei quali il trattamento ha determinato una riduzione della crescita tumorale. Nel complesso, questi risultati identificano CLIC1 come un bersaglio terapeutico rilevante e farmacologicamente modulabile nelle GSC. Tra i composti valutati, il TMT è emerso come il candidato più promettente per ulteriori studi di validazione in modelli di GBM più avanzati

GBM recurrence is strongly supported by GBM stem-like cells, which maintain tumor growth, invasion, and resistance to therapy. This study investigated CLIC1 as a potential therapeutic target in patient-derived GSC models and evaluated whether repurposed drugs could interfere with this aggressive compartment. CLIC1 was confirmed in GSC cultures at the transcript and protein levels, with evidence of membrane-associated localization and functional channel activity. MET and TMT both reduced GSC viability, growth, proliferation, stem cell frequency, and invasion, with stronger effects in stem-like than differentiated GBM cells. TMT showed the more favorable profile, acting at lower concentrations and inhibiting CLIC1-mediated currents more effectively than MET. In combination assays, both drugs enhanced the response to temozolomide under selected conditions. Their activity was also supported in zebrafish xenografts, where tumor growth was reduced after treatment. These findings support CLIC1 as a relevant and druggable vulnerability in GSCs. Among the tested compounds, TMT emerged as the most promising candidate for further validation in more advanced GBM models