Criobiopsia (CRYO) e utilizzo di vetrini con valutazione rapida in loco (ROSE) per le analisi molecolari nella diagnosi del tumore al polmone

Abstract

Introduzione: La corretta gestione dei campioni diagnostici è cruciale per il trattamento del carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC). I preparati ROSE potrebbero essere utilizzabili per analisi molecolari in alternativa ai campioni fissati, mentre la criobiopsia (CRYO) potrebbe risultare più rappresentativa del tessuto tumorale rispetto ai cell block e più adeguata per la valutazione di PD-L1. Metodi: Pazienti con sospetta neoplasia toracica sono stati sottoposti a EBUS-TBNA e criobiopsia in contemporanea. Durante le procedure sono stati eseguiti ROSE e touch imprint ROSE (TIR). Nei casi di diagnosi oncologica sono state effettuate analisi mediante Next Generation Sequencing (NGS) e valutazione di PD-L1. È stata valutata retrospettivamente la fattibilità dell’NGS su campioni ROSE/TIR e confrontata con l’NGS clinico. È stata inoltre confrontata l’espressione di PD-L1 tra campioni CRYO ed EBUS. Risultati: 71 pazienti sono stati inclusi (29 tumori primitivi, 5 metastasi extrapolmonari, 24 linfoadeniti granulomatose, 13 reperti non patologici). In 10 casi con mutazioni driver identificate da NGS clinico erano disponibili campioni ROSE/TIR per analisi retrospettiva. ROSE/TIR-NGS ha mostrato elevata concordanza con NGS clinico (9/10), con frequenze alleliche varianti spesso più alte. In 14 casi è stato possibile confrontare PD-L1 tra CRYO ed EBUS: CRYO ha mostrato valori generalmente superiori. In 4 casi il cell block non era adeguato per PD-L1, mentre in 2 casi CRYO risultava alto a fronte di bassa espressione nel cell block. Conclusioni: L’NGS su ROSE/TIR è una metodica fattibile e affidabile per la caratterizzazione molecolare, permettendo un uso più efficiente del tessuto e un avvio precoce delle analisi. La criobiopsia migliora inoltre la valutazione di PD-L1 rispetto ai cell block. L’integrazione delle tecniche può ottimizzare il workflow diagnostico e garantire una profilazione biomolecolare completa anche con campioni limitati.

Introduction: Optimal management of diagnostic samples is crucial for the treatment of non-small cell lung cancer (NSCLC). ROSE slides may be suitable for molecular analyses as an alternative to fixed samples, while cryobiopsy (CRYO) may provide more representative tumor tissue than cell blocks and be more appropriate for PD-L1 assessment. Methods: Patients with suspected thoracic malignancy underwent concurrent endobronchial ultrasound (EBUS) and cryobiopsy. During each procedure, ROSE and touch imprint ROSE (TIR) were performed. In cases of malignancy, Next Generation Sequencing (NGS) and PD-L1 assessment were carried out. A retrospective evaluation of NGS feasibility on ROSE/TIR samples (ROSE/TIR-NGS) was performed and compared with clinical NGS. PD-L1 expression was also compared between CRYO and EBUS samples. Results: Seventy-one patients were included (29 primary lung cancers, 5 extrapulmonary metastases, 24 granulomatous lymphadenitis, 13 non-pathological findings). In 10 cases with driver mutations identified by clinical NGS, ROSE/TIR slides were available for retrospective analysis. ROSE/TIR-NGS showed high concordance with clinical NGS (9/10 cases), often with higher variant allele frequencies. In 14 cases, PD-L1 expression was compared between CRYO and EBUS samples: CRYO generally showed higher expression. In 4 cases, the cell block was inadequate for PD-L1 evaluation, while in 2 cases CRYO showed high PD-L1 expression compared to low expression in the cell block. Conclusion: ROSE/TIR-NGS is a feasible and reliable method for molecular characterization, enabling efficient tissue use and earlier initiation of molecular testing. Moreover, cryobiopsy improves PD-L1 assessment compared to EBUS cell blocks. Integrating these techniques may optimize diagnostic workflow and ensure comprehensive biomarker profiling even with limited tissue availability.