Effetto dei fattori di adesione per la differenziazione di motoneuroni

Abstract

La SLA (Sclerosi Laterale Amiotrofica) è una malattia neurodegenerativa che induce la degenerazione dei motoneuroni, della quale ad oggi si ha una conoscenza limitata. Per studiare l’attività elettrofisiologica di motoneuroni affetti da SLA è fondamentale avere a disposizione un modello in vitro bidimensionale (2D) per la differenziazione su MEA (Micro Electrode Array) di motoneuroni. A questo scopo l’attività sperimentale si propone due obiettivi. Il primo obiettivo è verificare se la combinazione del fattore di adesione poli-L-ornitina con il fattore di adesione laminina può essere utilizzata su una superficie di vetro e quindi su MEA per la differenziazione in vitro 2D delle cellule progenitrici di motoneuroni sani e affetti da SLA in motoneuroni. Il secondo obiettivo è individuare in quale giorno nel processo di differenziazione delle cellule progenitrici neurali in motoneuroni è preferibile piastrare le cellule sane e affette da SLA sulla combinazione dei due fattori di adesioni sopracitati depositati su una superficie di vetro e quindi su MEA. Per eseguire la verifica è stata effettuata un’analisi di immagini di colture cellulari in vitro 2D. I dati estratti dalle immagini sono stati elaborati e infine graficati. Dall’analisi dei risultati si è giunti alla conclusione che la combinazione di poli-L-ornitina e laminina può essere utilizzata su una superficie di vetro e quindi su MEA per la differenziazione in vitro 2D delle cellule progenitrici di motoneuroni sani e affetti da SLA in motoneuroni. Il sesto e il settimo giorno della seconda fase di sviluppo sono i giorni del processo di differenziazione delle cellule progenitrici neurali in motoneuroni in cui è preferibile effettuare la piastratura, rispettivamente, delle cellule sane e affette da SLA sulla combinazione di poli-L-ornitina e laminina depositata su una superficie di vetro e quindi su MEA.

ALS (Amyotrophic Lateral Sclerosis) is a neurodegenerative disease that causes the degeneration of motor neurons, about which little is currently known. To study the electrophysiological activity of motor neurons affected by ALS it is essential to have a two-dimensional (2D) in vitro model available for the differentiation of motor neurons on MEA (Micro Electrode Array). To this end the experimental activity has two objectives. The first objective is to verify whether the combination of the adhesion factor poly-L-ornithine with the adhesion factor laminin can be used on a glass surface and therefore on MEA for the in vitro 2D differentiation of healthy and ALS-affected motor neuron progenitor cells into motor neurons. The second objective is to identify at which day in the differentiation process of neural progenitor cells into motor neurons it is preferable to plate healthy and ALS-affected cells on the combination of the two adhesion factors mentioned above deposited on a glass surface and then on MEA. To perform the verification an analysis of 2D in vitro cell culture images was performed. The data extracted from the images were processed and finally graphed. From the analysis of the results it was concluded that the combination of poly-L-ornithine and laminin can be used on a glass surface and therefore on MEA for the in vitro 2D differentiation of healthy and ALS-affected motor neuron progenitor cells into motor neurons. The sixth and seventh days of the second developmental phase are the days of the differentiation process of neural progenitor cells into motor neurons in which it is preferable to plate, respectively, healthy and ALS-affected cells on the combination of poly-L-ornithine and laminin deposited on a glass surface and then on MEA.