"Valutazione degli effetti gonadotossici delle terapie oncologiche in pazienti BRCA-mutati: il contributo del laboratorio alla ricerca".

Abstract

l carcinoma mammario è la neoplasia più diffusa nelle donne. I progressi terapeutici, inclusa la terapia a target molecolare, hanno migliorato la prognosi, ma rendono necessario valutare effetti collaterali come la possibile compromissione della fertilità. Questo studio analizza la gonadotossicità di Olaparib, un PARP-inibitore usato come adiuvante alla chemioterapia in pazienti BRCA-positive. Gli effetti del farmaco vengono confrontati in quattro condizioni: tessuti non trattati, Olaparib in monoterapia, chemioterapia convenzionale e combinazione Olaparib + chemioterapia.

Sono stati raccolti 15 campioni di tessuto ovarico da pazienti sotto i 45 anni sottoposte a isterectomia e annessiectomia bilaterale. Per l’analisi sono stati utilizzati i campioni delle 8 pazienti BRCA-positive. I frammenti di tessuto sono stati crioconservati, scongelati e trattati in vitro per 72 ore. Dopo il trattamento, i campioni sono stati processati per valutare morfologia follicolare, proliferazione cellulare e apoptosi tramite colorazione Ematossilina-Eosina e marcature YAP1, γH2A.X, caspasi-3 clivata e TUNEL.

I dati statisticamente significativi provengono dai campioni con almeno tre follicoli per condizione sperimentale. I risultati mostrano che l’Olaparib in monoterapia non aumenta il danno follicolare rispetto ai tessuti non trattati, mentre la combinazione con la chemioterapia presenta un profilo di danno simile a quello della sola chemioterapia, già nota per la sua elevata gonadotossicità.

Lo studio suggerisce che Olaparib da solo è meno dannoso per la fertilità rispetto alla chemioterapia. Sono previste ulteriori analisi di biologia molecolare e un’estensione dello studio al farmaco Abemaciclib nelle pazienti BRCA-negative, oltre a un confronto tra pazienti con e senza mutazione in assenza di terapia per valutare l’impatto della sola mutazione sulla fertilità.

Breast carcinoma is the most common neoplasm in women. Therapeutic advances, including targeted molecular therapy, have improved patient prognosis but have also made it necessary to assess side effects such as potential fertility impairment. This study analyzes the gonadotoxicity of Olaparib, a PARP inhibitor used as an adjuvant to chemotherapy in BRCA-positive patients. The effects of the drug are compared across four conditions: untreated tissues, Olaparib monotherapy, conventional chemotherapy, and combined Olaparib + chemotherapy treatment.

Fifteen ovarian tissue samples were collected from patients under 45 who underwent hysterectomy and bilateral adnexectomy. For the analysis, samples from the eight BRCA-positive patients were used. Tissue fragments were cryopreserved, thawed, and treated in vitro for 72 hours. After treatment, the samples were processed to evaluate follicular morphology, cell proliferation, and apoptosis using Hematoxylin–Eosin staining and YAP1, γH2A.X, cleaved caspase-3, and TUNEL labeling.

Statistically significant data were obtained from samples containing at least three follicles per experimental condition. The results show that Olaparib monotherapy does not increase follicular damage compared with untreated tissues, whereas the combination with chemotherapy exhibits a damage profile similar to chemotherapy alone, which is known to be highly gonadotoxic.

The study suggests that Olaparib alone is less harmful to fertility than chemotherapy. Further molecular biology analyses are planned, along with extending the study to the drug Abemaciclib in BRCA-negative patients and comparing tissues from patients with and without the mutation in the absence of therapy to assess whether the mutation itself affects fertility.