Mediatori cellulari implicati nei meccanismi di nefro-protezione del Dapagliflozin: uno studio sulle cellule tubulari renali umane.

Abstract

TITOLO: Effetti di Dapagliflozin sulle cellule epiteliali del tubulo prossimale. INTRODUZIONE: Dapagliflozin ha dimostrato di fornire una protezione renale nei pazienti con malattia renale cronica (MRC), indipendentemente dalla presenza di diabete. I meccanismi molecolari che mediano questo effetto sono molteplici e non ancora del tutto chiariti. SCOPO: Abbiamo valutato gli effetti del trattamento con Dapagliflozin sulle cellule dell’epitelio tubulare prossimale (PTCEs) isolate dalle urine di pazienti affetti da MRC. METODI: 32 pazienti con MRC sono stati randomizzati a Dapagliflozin verso placebo. Sono state isolate le PTECs dalle urine, ottenendo una linea primaria. L’espressione genica e proteica sono state valutate mediante rtPCR e western blot, rispettivamente. RISULTATI: nelle cellule dei pazienti in Dapagliflozin si osservava una riduzione della vimentina, proteina coinvolta nei processi che conducono alla fibrosi interstiziale, rispetto al placebo (p=0.0406). Il Dapagliflozin si dimostrava efficace nel ridurre i livelli di Dickkopf 3, marcatore di danno tubulare indotto da fattori stressanti (p=0.0451). Valutando i mediatori di infiammazione e immunità innata, nelle cellule dei pazienti trattati si osservava una riduzione dell’espressione della proteina chemioattrattiva dei monociti 1 (p=0.1890) e del Toll-like receptor 4 (p=0.0016) rispetto ai pazienti in placebo. In merito ai marcatori di senescenza, le cellule dei pazienti in Dapagliflozin mostravano riduzione della Senescence Associated-beta-Galattosidase (p=0.0018) e di p16INK4 (p=0.0444). CONCLUSIONI: L’effetto nefro-protettivo del Dapagliflozin risulta mediato dall’azione sui mediatori coinvolti nell’infiammazione e nell’immunità innata, capaci di condurre al danno tubulare e alla fibrosi. Il Dapagliflozin si è inoltre dimostrato capace di inibire l’espressione dei principali marcatori di senescenza, fenomeno che sta dimostrando di giocare un ruolo chiave nell’ambito della progressione della MRC.

TITLE: Effects of Dapagliflozin on Proximal Tubular Epithelial Cells. INTRODUCTION: Dapagliflozin has been shown to provide significant renal protection in patients with chronic kidney disease (CKD), regardless of the presence of diabetes. The molecular mechanisms mediating this effect are diverse and not yet fully understood. OBJECTIVE: The aim of the study was to evaluate the effects of Dapagliflozin treatment on proximal tubular epithelial cells (PTECs) isolated from the urine of patients with CKD. METHODS: 32 patients with CKD were randomized to receive Dapagliflozin or placebo. PTECs were isolated from urine to create a primary cell line. Gene and protein expression were evaluated by real-time polymerase chain reaction and Western blot, respectively. RESULTS: In cells from patients treated with Dapagliflozin, a reduction in vimentin, a protein involved in pathological processes leading to interstitial fibrosis, was observed compared to placebo (p=0.0406). Dapagliflozin was effective in reducing levels of Dickkopf 3, a marker of tubular damage potentially induced by stress factors (p=0.0451). When evaluating mediators of inflammation and innate immunity, cells from treated patients showed a reduction in expression of monocyte chemoattractant protein 1 (p=0.1890) and Toll-like receptor 4 (p=0.0016) compared to placebo patients. Regarding senescence markers, cells from patients treated with Dapagliflozin showed a reduction in Senescence-Associated β-Galactosidase (p=0.0018) and p16INK4 protein (p=0.0444). CONCLUSIONS: The nephroprotective effect of Dapagliflozin is mediated through its action on mediators involved in inflammation and innate immunity, which can lead to tubular damage and fibrosis. Dapagliflozin also proved to be effective in inhibiting the expression of key senescence markers, a phenomenon that is emerging as playing a crucial role in the progression of CKD.