Cinetica del DNA libero circolante come biomarcatore di recidiva nel melanoma stadio II-III operato

Abstract

Introduzione Nonostante le terapie adiuvanti riducano del 50% le recidive nel melanoma ad alto rischio, una quota di pazienti recidiva, e mancano strumenti affidabili per l'identificazione precoce. Lo studio valuta la cinetica del DNA libero circolante (cfDNA) e tumorale circolante (ctDNA) per l’identificazione precoce di malattia minima residua (MRD) nel melanoma resecato ad alto rischio. Metodi Studio prospettico su una coorte di pazienti con melanoma resecato (stadi II–IV) e sotto-coorte mutata BRAF/NRAS in terapia adiuvante con anti-PD1 o BRAF/MEK inibitori. I soggetti sono stati sottoposti a biopsia liquida al baseline (T0), al 6° (T1) e 12° mese (T2) di terapia adiuvante. Il cfDNA totale è stato quantificato con saggio Qubit, il ctDNA tramite ddPCR. Le curve di sopravvivenza sono state stimate con metodo di Kaplan-Meier e confrontate con il log-rank test; l'impatto prognostico della cinetica molecolare (∆BRAF/NRAS e ∆cfDNA) valutato con modelli di Cox univariati e multivariati per spessore di Breslow e terapia. Risultati Sono stati arruolati 103 pazienti e 31 nella sotto-coorte. Al follow-up mediano di 23 mesi, RFS e OS mediane non sono state raggiunte (RFS a 24 mesi: 64,1%; OS: 87,5%), senza differenze tra terapie (RFS p=0,799; OS p=0,375). Nella sotto-coorte il gruppo MRD-positivo a T0 ha mostrato una tendenza a RFS inferiore rispetto al braccio MRD-negativo (HR=2,61; IC95%=0,75-9,10; p=0,131). All'analisi cinetica, ogni incremento di ctDNA aumenta il rischio di recidiva di 4,97 volte (HR=4,97; p=0,060), restando stabile in multivariata. La cinetica del cfDNA è il parametro più solido: ogni incremento di concentrazione aumenta del 50% il rischio di recidiva (HR=1,50; IC95%=1,08-2,08; p=0,014), mantenendo il valore in multivariata per Breslow (HR=1,51; p=0,022) e terapia (HR=1,50; p=0,015). Conclusioni La cinetica del cfDNA è un potenziale biomarcatore prognostico per anticipare la recidiva rispetto alla diagnostica standard, verso una terapia personalizzata.

Background Despite adjuvant therapies reducing recurrences by 50% in high-risk melanoma, a proportion of patients relapses, and reliable tools for early identification are lacking. The study evaluates the kinetics of circulating free DNA (cfDNA) and circulating tumor DNA (ctDNA) for the early detection of minimal residual disease (MRD) in resected high-risk melanoma. Methods Prospective study on a cohort of patients with resected high-risk melanoma (stages II–IV), with a BRAF/NRAS-mutated sub-cohort undergoing adjuvant therapy with anti-PD1 or BRAF/MEK inhibitors. Patients underwent liquid biopsy at baseline (T0), month 6 (T1), and 12 (T2) of adjuvant therapy. Total cfDNA was quantified via Qubit assay, and ctDNA via ddPCR. Survival curves were estimated with the Kaplan-Meier method and compared via log-rank test; the prognostic impact of molecular kinetics (∆BRAF/NRAS and ∆cfDNA) was evaluated with univariate and multivariate Cox proportional hazards models adjusted for Breslow thickness and therapy. Results 103 patients were enrolled, 31 in the sub-cohort. At a median follow-up of 23 months, median RFS and OS were “not reached” (24-month RFS: 64.1%; OS: 87.5%), with no differences between therapies (RFS p=0.799; OS p=0.375). In the sub-cohort, the MRD-positive group at T0 showed a trend toward lower RFS compared to the MRD-negative arm (HR=2.61; 95%CI=0.75-9.10; p=0.131). In the kinetic analysis, each ctDNA increase raised the risk of recurrence 4.97-fold (HR=4.97; p=0.060), remaining stable in multivariate analysis. cfDNA kinetics is the most robust parameter: each concentration increase was associated with a 50% increase in recurrence risk (HR=1.50; 95%CI=1.08-2.08; p=0.014), maintaining its value in multivariate models for Breslow thickness (HR=1.51; p=0.022) and therapy (HR=1.50; p=0.015). Conclusions Longitudinal cfDNA kinetics is a potential prognostic biomarker to anticipate recurrence compared to standard diagnostics, to personalize adjuvant strategies.