Sviluppo e validazione di un metodo per l'analisi multi-strumento di cannabinoidi

Abstract

Lo scopo del presente lavoro di tesi è lo sviluppo di un metodo rapido per l’identificazione e la quantificazione di 16 cannabinoidi potenzialmente presenti in matrici vegetali. In particolare il metodo consente l’identificazione degli analiti di interesse mediante l’utilizzo della gascromatografia accoppiata ad un rivelatore di massa (GC-MS), con loro seguente quantificazione per mezzo dell’impiego della cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC), accoppiata ad un rivelatore spettrofotometrico nell’ultravioletto a serie di diodi (UV-Vis-DAD). Si è fatto uso della cromatografia liquida per valutare l’efficacia di un metodo a freddo, in grado di evitare la decarbossilazione delle specie acide e consentirne la corretta determinazione, principale problematica delle tecniche a “caldo” come la gascromatografia comunemente adottata in questo genere di analisi. Il metodo illustrato ha un range di applicabilità compreso tra lo 0,05 e il 100 %m/m il quale ricopre tutto lo spettro delle sostanze stupefacenti contenenti cannabinoidi. La validazione è stata effettuata per determinare l’affidabilità del dato ricavato dal metodo in questione; sono stati selezionati criteri di validazione con lo scopo di coprire un range il più ampio possibile di condizioni operative per avere scenari di analisi riproducibili e accurati.

The aim of this thesis work is the development of a rapid method for the identification and quantification of 16 cannabinoids potentially present in plant matrices. Specifically, the method allows the identification of the target analytes using gas chromatography coupled with a mass spectrometer (GC-MS), followed by their quantification using high-performance liquid chromatography (HPLC) coupled with an ultraviolet-visible diode array detector (UV-Vis-DAD). Liquid chromatography was employed to evaluate the effectiveness of a cold method, capable of preventing the decarboxylation of acidic species and allowing their accurate determination, a main limitation of “hot” techniques such as gas chromatography, which is commonly used in this type of analysis. The illustrated method has an applicable range between 0.05 and 100 %w/w, covering the full spectrum of cannabinoid-containing narcotic substances. Validation was carried out to assess the reliability of the data obtained from the method; validation criteria were selected with the aim of covering as wide a range of operating conditions as possible to ensure reproducible and accurate analytical scenarios.